PCR 實驗室(聚合酶鏈式反應實驗室)的核心設計目標是防止交叉污染(尤其是氣溶膠污染),確保實驗結果的準確性和可靠性。其功能分區與布局策略嚴格遵循 PCR 實驗的 “樣本處理→核酸提取→擴增→產物分析” 單向流程,同時通過物理隔離、壓力控制、氣流導向等手段阻斷污染傳播路徑。
一、功能分區標準與要求
PCR實驗室需嚴格遵循單向流程設計,通常劃分為四個核心區域,各區域功能與氣壓控制要求如下:
1.試劑準備區
功能:擴增試劑的配制、分裝及保存。
氣壓要求:保持微正壓,通過控制進風風量大于排風風量實現,防止外界含核酸氣溶膠的空氣進入。
設備配置:超凈工作臺、冰箱、天平、離心機等,需定期校準加樣器與天平。
2.標本制備區
功能:樣品登記、分裝、核酸提取、保存及加樣。
氣壓要求:相對試劑準備區為負壓,防止核酸/樣本氣溶膠倒灌。
設備配置:A2型生物安全柜、離心機、溫育儀、混勻器等,需配備移動紫外燈進行局部消毒。
3.擴增區
功能:DNA擴增及反應監測。
氣壓要求:相對標本制備區為更大負壓,排風量需大于送風量,確保擴增產物氣溶膠不外泄。
設備配置:核酸擴增儀、超凈臺、微量加樣器、離心機等,配備UPS電源以防電壓波動影響結果。
4.產物分析區
功能:擴增產物的測定、結果分析及報告。
氣壓要求:相對擴增區為最大負壓,嚴格防止擴增產物外泄。
設備配置:酶標儀、洗板機、凝膠成像系統等,需設置專用廢棄物處理通道。
二、布局策略與規范
1.物理隔離與單向流動
區域分隔:各功能區需嚴格物理隔離,采用實體墻或彩鋼板分隔,墻體需氣密性好,地面使用PVC卷材或自流坪。
流程設計:人流、物流、氣流均需遵循單向流動原則,即“試劑準備區→標本制備區→擴增區→產物分析區”,嚴禁逆向行走。
緩沖間設置:每個主功能區入口設緩沖間,形成氣閘,維持壓差梯度。緩沖間對公共走廊為正壓,對主功能區為負壓,確保壓差穩定。
2.氣壓與氣流控制
氣壓梯度:試劑準備區(正壓)→ 緩沖間 → 標本制備區(負壓)→ 擴增區(更大負壓)→ 產物分析區(最大負壓)。
通風系統:采用全新風系統或獨立直排式空調,避免交叉污染。送風口位于房間頂部,經初效、中效、高效空氣過濾器(HEPA)處理;排風口位于房間下部或生物安全柜/儀器排風口直接連接排風系統,排風需經HEPA過濾后高空排放。
監測與報警:安裝壓差計于各緩沖間和關鍵區域門口,實時監控壓差、溫濕度。
3.設備與設施配置
生物安全柜:標本制備區必須使用A2型生物安全柜,排風接入實驗室獨立排風系統,嚴禁室內循環。
傳遞窗:試劑和標本通過機械連鎖不銹鋼傳遞窗傳遞,確保密封性;清潔物品與污染物品需分開傳遞。
消毒設施:各區域配備紫外燈,緩沖間設置移動紫外燈,實驗結束后進行全面消毒;廢棄物經消毒液浸泡后密封處理,遠離實驗室區域。
4.環境與安全管理
墻體與地面:實驗室墻體結構牢固,陰角采用圓弧形線條過渡,內壁光潔、耐腐蝕、易清洗;地面無縫隙、無滲漏,使用PVC卷材或大塊瓷磚。
照明與標識:燈具選用凈化燈具,便于清洗;各區域設置明顯標識,包括功能區名稱、氣壓狀態、緊急出口等。
人員管理:嚴格控制進出實驗室人員,實驗無關人員不得隨意進入;工作人員需更換專用實驗服,不同區域使用不同顏色工作服,離開時不得將工作服帶出。
三、特殊情況與擴展性設計
合并區域:若使用全自動分析儀,產物分析區可與擴增區合并,但需嚴格管理,避免交叉污染。
分散式布局:對于實驗用房相距較遠的分散式布局,各區域可獨立設置,但需確保單向流程與氣壓控制。
可擴展性:預留空間與設備管線條件,便于未來擴建或功能調整;核心區可設置專用走廊,減少室內外空氣交換。
PCR實驗室的規范化設計需以“單向流程、氣壓控制、物理隔離”為核心,通過嚴格的功能分區、氣壓梯度設置、通風系統優化及設備配置,確保實驗結果的準確性、防止交叉污染,并保障人員與環境安全。設計施工需由專業團隊完成,并經過嚴格的檢測驗證(如壓差測試、氣流流型測試、潔凈度測試等)方可投入使用。